BX53生(sheng)物顯微鏡(jing)除(chu)目前推(tui)崇的冰(bing)凍超薄(bo)切片法(fa)外,在(zai)這裏(li)再(zai)介紹(shao)壹(yi)種科(ke)學家(jia)們用過(guo)的沈(chen)積(ji)技(ji)術。在進(jin)行分(fen)析前加(jia)入壹(yi)種物(wu)質,使(shi)之(zhi)與待分析的成(cheng)份形(xing)成沈(chen)積(ji)物(wu)以(yi)固定它(ta),然(ran)後分析該(gai)沈(chen)積(ji)物(wu)。例如,人們常用(yong)草酸鹽(yan)與焦(jiao)銻(ti)酸鹽(yan)去沈(chen)積(ji)肌(ji)細(xi)胞(bao)中(zhong)的ca。前者對(dui)胞(bao)漿中(zhong)低(di)濃度(du)的ca敏(min)感(gan)性(xing)不(bu)夠高(gao);焦(jiao)銻(ti)吱(zhi)鹽(yan)的敏(min)感(gan)性(xing)高(gao)些(xie),可與腦漿中(zhong)遊(you)離ca形(xing)成電子致密的沈(chen)積(ji)物(wu),但(dan)焦(jiao)銻(ti)酸鹽(yan)與鈉、錳(meng)、鋇、鐵也(ye)形(xing)成沈(chen)積(ji)物(wu),特(te)異性(xing)較(jiao)差(cha)。標本制備(bei)過(guo)程類(lei)似(si)於(yu)普(pu)通透(tou)射電鏡(jing)超薄(bo)切片標本的制(zhi)備(bei),不(bu)同(tong)之(zhi)處在(zai)於(yu)固(gu)定前3%焦(jiao)銻(ti)酸鉀(jia)固(gu)定6小時(shi),在(zai)染色(se)的肌(ji)肉(rou)超薄(bo)切片上,在(zai)每(mei)個(ge)肌節(jie)的A帶(dai)和2帶(dai)的中(zhong)線(xian)可見黑色沈(chen)澱物、再(zai)用未染色(se)的切片做X射(she)線(xian)微區(qu)分(fen)析。曾用(yong)二氨基聯(lian)苯(ben)胺(an)四鹽(yan)酸去沈(chen)澱含血紅(hong)素的物(wu)質等等。這種組(zu)化的沈(chen)澱反應與x射線微區(qu)分(fen)橋(qiao)聯(lian)合應(ying)用在(zai)不具(ju)備(bei)冰(bing)凍超薄(bo)切片條件(jian)的實(shi)驗(yan)室可考慮(lv)采用(yong)。根據(ju)待(dai)分(fen)析元(yuan)素的峰(feng)高可做半(ban)定量。
理(li)論上(shang),任何光學系(xi)統(tong)都不(bu)能(neng)生成(cheng)理想的像,因(yin)為(wei)客(ke)觀條(tiao)件(jian)下(xia),各(ge)類像差(cha)的存(cun)在影(ying)響(xiang)了(le)BX53生(sheng)物顯微鏡(jing)的成(cheng)像質量(liang)。除(chu)了(le)像差(cha)之外,還有(you)壹(yi)些(xie)BX53生(sheng)物(wu)顯微鏡(jing)自(zi)身存在(zai)的因(yin)素影(ying)響(xiang)BX53生(sheng)物(wu)顯微鏡(jing)的成(cheng)像質量(liang)。主(zhu)要有(you)如下(xia)幾(ji)點:
1)在使用顯微鏡(jing)時(shi),被(bei)檢物體做的比(bi)較標準(zhun)很(hen)重(zhong)要。如:切片厚度(du)是(shi)否太(tai)厚(hou),蓋(gai)玻(bo)片(pian)是(shi)否符合(he)標(biao)準等。
2)物鏡(jing)按檔次可分為(wei)6~8個(ge)檔,常(chang)用的為(wei)平場消(xiao)色(se)差(cha)物鏡(jing)。如鏡(jing)頭檔次太低(di),則成(cheng)像質量(liang)會(hui)下(xia)降(jiang)。因(yin)此(ci),建議選(xuan)擇(ze)平場以(yi)上(shang)檔次物鏡(jing)。
3)聚(ju)光鏡(jing)孔(kong)徑光欄盡量(liang)和(he)物(wu)鏡(jing)的數(shu)值孔(kong)徑相符,才(cai)能(neng)得到理(li)想的圖像分辨(bian)率(lv)。
4)調(tiao)焦(jiao)系統(tong)作(zuo)為(wei)機械(xie)部分(fen)的重(zhong)要部件(jian),調(tiao)焦(jiao)精度(du)也(ye)非常重(zhong)要。對(dui)於(yu)生(sheng)物(wu)學初(chu)學者或(huo)剛(gang)接(jie)觸(chu)BX53生物顯微鏡(jing)的操作者,熟練(lian)使用(yong)調(tiao)調(tiao)焦(jiao)系統(tong),能(neng)快速找到圖像並聚焦(jiao),提高(gao)工(gong)作(zuo)效率(lv)。
5)載(zai)物臺(tai)在觀(guan)察(cha)切片時(shi),常(chang)做X、Y軸的移(yi)動。如:雙層(ceng)機械(xie)移(yi)動臺(tai),精度(du)和(he)穩定性(xing)較(jiao)好,能在(zai)觀(guan)察(cha)顯微圖像時(shi)提(ti)供好的成(cheng)像質量(liang)。
6)非球面聚(ju)光鏡(jing)能(neng)提供非常均勻(yun)的照(zhao)明光線,所(suo)觀察(cha)到的顯微圖像襯度。
7)視(shi)場光欄應根據(ju)觀(guan)察(cha)不同(tong)的被(bei)檢物體和物鏡(jing)倍率(lv)開啟到(dao)合(he)適(shi)的位(wei)置(zhi),如開得過(guo)大(da)或(huo)過(guo)小(xiao)顯微圖像的視(shi)場亮度會(hui)受(shou)到影(ying)響(xiang)。
8)照(zhao)明(ming)系統如采用(yong)溫度低(di),色溫較高(gao)的照(zhao)明裝置(zhi),BX53生(sheng)物(wu)顯微鏡(jing)觀(guan)察(cha)到的是(shi)分(fen)辨(bian)率(lv)和銳(rui)利(li)度(du)較高的顯微圖像。