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          技(ji)術(shu)文(wen)章/ TECHNICAL ARTICLES

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          奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡光路照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的調(tiao)整(zheng)有(you)4項(xiang)內(nei)容

          更新(xin)時間(jian):2019-11-18      瀏(liu)覽次(ci)數(shu):3915

          (1) 照(zhao)明(ming)光源(yuan)燈室(shi)在顯(xian)微(wei)外的初步調(tiao)整(zheng)
          ① 首(shou)先將燈室(shi)的外殼打開,壓(ya)彈(dan)簧(huang)夾(jia)子(zi)將(jiang)鹵(lu)素(su)燈泡(pao)裝(zhuang)入插(cha)座中(zhong),安(an)裝(zhuang)時避免(mian)手(shou)指(zhi)直(zhi)接(jie)接(jie)觸燈泡(pao)(可(ke)用(yong)柔(rou)軟(ruan)的布(bu)或紙隔住(zhu)),以免燈泡(pao)上(shang)留有(you)指(zhi)紋等臟(zang)物,影(ying)響(xiang)燈泡(pao)的(de)使用(yong)壽命。
          ② 把(ba)燈室(shi)擺(bai)在桌面上(shang),接(jie)通(tong)電源(yuan)後(hou),用(yong)的(de)螺(luo)絲刀調(tiao)節(jie)燈的(de)調(tiao)焦(jiao)旋鈕孔(標有(you)"←→"),使燈絲(si)投影(ying)在(zai)1-2m外的墻(qiang)上(shang),將燈絲(si)成(cheng)像調(tiao)至(zhi)清晰;然後調(tiao)節(jie)燈的(de)高低(di)位置調(tiao)節(jie)絲(si)孔(kong)(標有"──"),使(shi)燈絲(si)位置高低(di)適(shi)當;再調(tiao)節(jie)燈的(de)左右(you)位置調(tiao)節(jie)螺(luo)絲(si)孔(標有(you)"──"),使(shi)燈絲(si)左右(you)位置合適(shi)。 

          2) 光源(yuan)發光體(燈絲(si))在奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡內(nei)位置的檢(jian)驗(yan)和校(xiao)正:
          目的是為(wei)了(le)把(ba)發光體的像端端正正地(di)調(tiao)入(ru)物鏡的(de)視域範(fan)圍內(nei),從(cong)光源(yuan)的(de)角(jiao)度去(qu)確保奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)視域受(shou)到(dao)充(chong)分而均(jun)勻的(de)照(zhao)明(ming),這(zhe)是調(tiao)整(zheng)庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的前提條件(jian)。需(xu)要的基本工(gong)具(ju):對(dui)中(zhong)望(wang)遠(yuan)鏡購置奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡時已配(pei)備。
          ① 拔掉(diao)燈庫(ku)內(nei)的(de)毛玻(bo)璃套筒(tong),把(ba)燈室(shi)裝(zhuang)回奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡上(shang);

          ② 選用(yong)10×物鏡,開(kai)亮(liang)光源(yuan)程(cheng)序(xu)找(zhao)樣(yang)品並調(tiao)焦(jiao)清晰,再換用(yong)40×物鏡把(ba)樣(yang)品調(tiao)焦(jiao)清 晰(40×物鏡可(ke)以(yi)看(kan)清燈絲(si)的全貌);

          ③ 把(ba)聚(ju)光鏡的孔徑(jing)光闌(lan)和(he)視場光闌(lan)均(jun)開到(dao)大;
          ④ 拔(ba)掉其(qi)中壹個目(mu)鏡,換上(shang)對中(zhong)望(wang)遠(yuan)鏡,抓住(zhu)白(bai)色(se)部分,另壹手(shou)伸縮黑(hei)色(se)接(jie)目鏡,就可(ke)在(zai)視野(ye)中看(kan)到(dao)燈絲(si)像;
          ⑤ 如(ru)燈絲(si)位置不(bu)合適(shi),調(tiao)"──"孔(kong),把(ba)燈絲(si)像沿(yan)水(shui)平(ping)方向調(tiao)好(hao),調(tiao)"──"孔(kong),把(ba)絲(si)像沿(yan)垂(chui)直(zhi)方向調(tiao)好(hao),直(zhi)至將(jiang)燈絲(si)像調(tiao)至(zhi)剛(gang)好充(chong)滿物鏡孔(kong)徑(jing)的光圓(yuan)像;
          ⑥ 調(tiao)整(zheng)完畢後,將(jiang)毛玻(bo)璃套筒(tong)插回(hui)原位,拔掉(diao)對(dui)中望(wang)遠(yuan)鏡,換回(hui)目鏡(jing)作下(xia)壹步調(tiao)整(zheng)。以(yi)上(shang)所述照(zhao)明(ming)光源(yuan)燈室(shi)在奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡外的調(tiao)整(zheng)和(he)光源(yuan)發光體在奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡內(nei)位置的校(xiao)驗(yan),只需(xu)在奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡初次(ci)安(an)裝(zhuang)調(tiao)試(shi)及(ji)更換燈泡(pao)時進行,平(ping)時使用(yong)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡時不(bu)能隨(sui)意亂(luan)調(tiao)亂(luan)動(dong)。萬(wan)壹調(tiao)亂(luan)時,可(ke)按(an)上(shang)述步驟調(tiao)回(hui)原(yuan)狀(zhuang)。

          (3) 庫勒(le)照(zhao)明(ming)(Kohler)系(xi)統(tong)的正確調(tiao)整(zheng):

           奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)正確調(tiao)試(shi),主(zhu)要工作之壹是照(zhao)明(ming)光路系統的(de)調(tiao)整(zheng),而(er)其(qi)中的(de)關鍵(jian)是庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的調(tiao)整(zheng)。對(dui)於(yu)每(mei)壹位使用(yong)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)人(ren)員,特別(bie)是作顯(xian)微(wei)照(zhao)像的人員(yuan)來說,應(ying)該(gai)對庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的原理及(ji)其(qi)調(tiao)整(zheng)步驟有壹定的(de)了(le)解和(he)掌(zhang)握,才(cai)能充(chong)分發揮(hui)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡應(ying)有(you)的功(gong)能(neng),拍(pai)出(chu)來的照(zhao)片(pian)才(cai)能(neng)在效果上(shang)比(bi)較(jiao)壹致而又完善(shan)。

          庫勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的原理簡(jian)單來說(shuo)就(jiu)是:光源(yuan)發光體上任(ren)意(yi)壹點發出(chu)的光,可(ke)以(yi)照(zhao)明(ming)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)視域範(fan)圍,而(er)光源(yuan)發光體上每(mei)壹點所(suo)發出(chu)的光匯集起來(lai),在(zai)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)視域中(zhong)就(jiu)實現了(le)非(fei)常充(chong)分而又均(jun)勻的(de)照(zhao)明(ming)。

          調(tiao)整(zheng)庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的目的,是為(wei)了(le)使(shi)所觀(guan)察(cha)的(de)視域能(neng)獲(huo)得均(jun)勻而(er)又充(chong)分的照(zhao)明(ming),防止(zhi)雜(za)散(san)光對照(zhao)像系統造成(cheng)影(ying)響(xiang)或幹擾(rao),以免(mian)照(zhao)像時在底片(pian)形(xing)成(cheng)灰(hui)霧(wu)。

          高調(tiao)整(zheng)庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)的必(bi)要部件:視場光闌(lan)、可(ke)進行合軸(zhou)調(tiao)整(zheng)的(de)聚(ju)光鏡系統。
          ① 選用(yong)10×物鏡和(he)10×目鏡(jing);
          ② 把(ba)聚(ju)光鏡前端透(tou)鏡擺(bai)進光路中,孔徑(jing)光闌(lan)調(tiao)至(zhi)適(shi)中(zhong)的位置上(不(bu)大不(bu)小),再把(ba)聚(ju)光鏡升到頂的位置上,聚(ju)光鏡轉(zhuan)盤調(tiao)至(zhi)明(ming)視野(ye)"J"位置;
          ③ 把(ba)視場光闌(lan)調(tiao)至(zhi)小(0。1);
          ④ 載物臺上(shang)放上(shang)已封(feng)片(pian)的(de)生(sheng)物樣品,開(kai)亮(liang)光源(yuan),調(tiao)焦(jiao)清晰;
          ⑤ 視域中(zhong)會出(chu)現(xian)壹個局(ju)部照(zhao)明(ming)的(de)區(qu)域(yu)或亮(liang)斑,這(zhe)是視場光闌(lan)的(de)模(mo)糊像,在其(qi)中可(ke)以(yi)清晰地(di)看(kan)到(dao)樣品的(de)細節;在(zai)它(ta)之外是較(jiao)暗(an)的(de)視域,不(bu)壹定能(neng)把(ba)樣(yang)品的(de)細節看(kan)得(de)清楚(chu);
          ⑥ 把(ba)聚(ju)光鏡微(wei)微(wei)地(di)向下(xia)調(tiao),使(shi)視野(ye)中的(de)亮(liang)斑逐(zhu)漸收小,慢慢變成(cheng)壹個清晰的多邊(bian)形(xing)象,這便是視場光闌(lan)的(de)清晰像;
          ⑦ 壹般情(qing)況下(xia),多(duo)邊形(xing)象並不(bu)在視域中(zhong)央(yang),需要調(tiao)整(zheng)聚(ju)光鏡的壹對調(tiao)中(zhong)螺(luo)絲(si),把(ba)視場光闌(lan)多(duo)邊形(xing)的像調(tiao)至(zhi)中(zhong)央(yang)位置;
          ⑧ 逐(zhu)漸開大視場光闌(lan),使(shi)多邊(bian)形(xing)象成(cheng)為(wei)視域的(de)內(nei)接(jie)多邊形(xing),進壹步核(he)對調(tiao)中(zhong)的(de)狀(zhuang)況,如(ru)對中不(bu)夠理(li)想,繼續微(wei)微(wei)調(tiao)對(dui)中(zhong)螺(luo)絲;
          ⑨ 將視場光闌(lan)稍(shao)為(wei)再微(wei)微(wei)開大(da)壹些(xie),使它(ta)的多邊(bian)形(xing)象恰好(hao)消(xiao)失(shi)在(zai)視域的(de)邊(bian)緣(yuan)上,至(zhi)此(ci),庫(ku)勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)調(tiao)整(zheng)完畢。庫勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong)調(tiao)整(zheng)好(hao)以(yi)後,整個(ge)視域照(zhao)明(ming)均(jun)勻,拍(pai)攝(she)的顯(xian)微(wei)照(zhao)片(pian)明(ming)亮(liang)清晰,反差正常。

          在日後使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)應特別(bie)註意:

           a。 視場光闌(lan)不(bu)可(ke)任(ren)意(yi)開大(da),但(dan)可(ke)隨(sui)物鏡倍(bei)數(shu)的(de)增大(da)而將視場光闌(lan)收小,隨(sui)物鏡倍(bei)數(shu)的(de)減(jian)小而開大;

           b。 聚光鏡的高低(di)位置不(bu)準(zhun)亂(luan)調(tiao),否則會破壞(huai)已調(tiao)整(zheng)好(hao)的(de)庫勒(le)照(zhao)明(ming)系(xi)統(tong);

           c。 使用(yong)10×以(yi)下(xia)物鏡時要將聚光鏡前端透(tou)鏡擺(bai)出光路外,使用(yong)10×或10×以上(shang)物鏡時要將前端透(tou)鏡擺(bai)入光路中;

           d。 關於物鏡倍(bei)數(shu)與(yu)視場光闌(lan)大(da)小配合問(wen)題,在(zai)實際使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong),作為(wei)壹般觀(guan)察(cha)不(bu)壹定要收小或開大(da)視場光闌(lan),但(dan)作顯(xian)微(wei)照(zhao)相(xiang)時,為了避免(mian)雜散(san)光線(xian)對(dui)照(zhao)相(xiang)系(xi)統(tong)的幹擾,以便(bian)能(neng)拍(pai)攝(she)到較(jiao)完善(shan)的(de)照(zhao)片(pian),則應在(zai)使(shi)用(yong)每(mei)壹個倍(bei)數(shu)的(de)物鏡時,把(ba)視場光闌(lan)調(tiao)節(jie)到(dao)正好(hao)消失(shi)於所(suo)觀(guan)察(cha)的(de)視域邊(bian)上(shang),這是比(bi)較(jiao)繁(fan)復(fu)的工(gong)作,但(dan)又非(fei)做(zuo)不(bu)可(ke)。

          較(jiao)為(wei)簡(jian)便的方法是把(ba)與(yu)各個倍(bei)數(shu)物鏡相(xiang)對應(ying)的(de)視場光闌(lan)事(shi)先調(tiao)整(zheng)好(hao),並作好(hao)記(ji)號,以後使用(yong)時根(gen)據(ju)記(ji)號直(zhi)接(jie)調(tiao)至(zhi)相(xiang)應(ying)的位置。

          (4) 孔徑(jing)光闌(lan)的(de)正確使(shi)用(yong): 
          由(you)於聚光鏡的孔徑(jing)光闌(lan)可(ke)以(yi)影(ying)響(xiang)奧林(lin)巴斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)分辨(bian)率,使用(yong)時應掌握正確的(de)使用(yong)方法。

          過去(qu)由(you)於對孔徑(jing)光闌(lan)的(de)認識(shi)不(bu)足,往(wang)往把(ba)它(ta)當作是調(tiao)節(jie)視野(ye)亮(liang)度的(de)工具(ju)。雖然調(tiao)節(jie)孔(kong)徑(jing)光闌(lan)在(zai)壹定程(cheng)度(du)上可(ke)以(yi)改(gai)變視野(ye)的亮(liang)度,但(dan)會直(zhi)接(jie)影(ying)響(xiang)成(cheng)像的反差(cha)、對比(bi)度(du)及(ji)分辨(bian)率,在使用(yong)過程(cheng)中(zhong)應盡可(ke)能(neng)避免(mian)。為了(le)發揮(hui)聚光鏡孔徑(jing)光闌(lan)的(de)作用(yong),以(yi)便(bian)在觀(guan)察(cha)時,尤其(qi)在作顯(xian)微(wei)照(zhao)相(xiang)時獲得分辨(bian)率,在每(mei)換用(yong)壹個倍(bei)數(shu)的(de)物鏡時,在樣品調(tiao)焦(jiao)清晰後,需要調(tiao)節(jie)孔(kong)徑(jing)光闌(lan),使(shi)它(ta)的大小正好(hao)等於(yu)所用(yong)物鏡數(shu)值孔(kong)徑(jing)(物鏡孔(kong)徑(jing)像)的2/3。

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