熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)及熒(ying)光(guang)數碼成(cheng)像(xiang)拍照的選擇及註(zhu)意事項

熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)以及熒(ying)光(guang)拍照相機(ji)(顯(xian)微鏡(jing)相機(ji))

熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)是(shi)用(yong)短(duan)波長(chang)的光線(xian)照射用(yong)熒(ying)光(guang)素染(ran)色過的被檢物(wu)體(ti)，使(shi)之(zhi)受(shou)激(ji)發(fa)後(hou)而(er)產生(sheng)長(chang)波長(chang)的熒(ying)光(guang)，然(ran)後(hou)觀(guan)察。熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)廣泛(fan)應用(yong)於(yu)生(sheng)物(wu)，醫學等(deng)領域(yu)等(deng)

⑴熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)—般分為(wei)透射和落射式兩種(zhong)類型(xing)。

a.透射式激(ji)發(fa)光(guang)來自(zi)被檢物(wu)體(ti)的下方(fang)，聚(ju)光(guang)鏡為暗視(shi)野(ye)聚(ju)光(guang)鏡，使發光(guang)不(bu)進入(ru)物(wu)鏡，而使熒(ying)光(guang)進(jin)入(ru)物(wu)鏡。它(ta)在低倍(bei)情況(kuang)下明(ming)亮(liang)，而高怕(pa)僅(jin)暗(an)，在註(zhu)漫(man)和淘(tao)中(zhong)時(shi)，較誰(shui)操作，尤(you)以低倍(bei)的照明(ming)被(bei)圍準(zhun)於(yu)確定，但(dan)能(neng)得(de)到(dao)很暗的視(shi)野(ye)背景。透射式不(bu)使用(yong)於(yu)非(fei)透明(ming)的被檢物(wu)體(ti)。

b.落射式目(mu)前(qian)幾(ji)乎被(bei)淘汰(tai)，新型的熒(ying)光(guang)顯(xian)微統(tong)多(duo)為(wei)落射式，光源(yuan)來自(zi)被檢動依的上方(fang)，在光路(lu)中(zhong)具有(you)分光(guang)鏡(jing)，所(suo)以(yi)對透明(ming)和不(bu)適明(ming)的被檢物(wu)休體(ti)都(dou)適(shi)用(yong)。由於物(wu)確起(qi)了(le)聚(ju)光(guang)接的作用(yong)，不(bu)僅(jin)便(bian)於操作，而(er)且從(cong)低倍(bei)到(dao)高倍(bei)，可(ke)以(yi)實(shi)現(xian)整個視(shi)場(chang)的均勻照明(ming)。

(2)熒(ying)光(guang)鏡(jing)檢(jian)術的註(zhu)意事項

a.激(ji)發(fa)光(guang)長(chang)時(shi)間的照射，會(hui)發(fa)生光的衰減和淬(cui)滅現(xian)象，因(yin)此盡(jin)可(ke)能(neng)縮(suo)短(duan)觀察時(shi)間，暫(zan)時(shi)不(bu)觀察時(shi)，應用(yong)擋(dang)板(ban)遮(zhe)蓋(gai)發(fa)光。

b.作油鏡(jing)觀(guan)察時(shi)，應用(yong)無(wu)熒(ying)光(guang)鏡(jing)油"。

c.做(zuo)熒(ying)光(guang)實(shi)驗(yan)，普遍熒(ying)光(guang)比(bi)較(jiao)弱，應在較暗(an)的室內進(jin)行。電(dian)源(yuan)可(ke)裝(zhuang)穩(wen)壓器(qi)，否則電壓不(bu)穩不(bu)僅(jin)會(hui)降低汞(gong)燈(deng)的壽命，也(ye)會(hui)影響(xiang)效(xiao)果，目(mu)前(qian)新研究領域(yu)都(dou)會(hui)用(yong)到(dao)熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)，如基(ji)因原(yuan)位雜(za)交(jiao)FISH)等(deng)。

熒(ying)光(guang)拍攝(she)通(tong)常需(xu)要(yao)使(shi)用(yong)制冷型CCD（成(cheng)像(xiang)系統(tong)相機(ji)），因(yin)為制冷CCD可(ke)以(yi)減少背景噪(zao)聲，對弱熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)采(cai)集很有(you)好處(chu)，特(te)別是(shi)像(xiang)單分子(zi)成(cheng)像(xiang)。采(cai)集強光(guang)信(xin)號(hao)不(bu)壹定要(yao)用(yong)制冷CCD，可(ke)使(shi)用(yong)黑(hei)白(bai)相機(ji)，彩(cai)色相機(ji)不(bu)適合熒(ying)光(guang)采(cai)集，因為(wei)其感(gan)光度低、分辨率(lv)也(ye)低，除(chu)非(fei)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)很高，對分辯(bian)率(lv)要(yao)求(qiu)不(bu)高或者(zhe)使用(yong)雙通(tong)道(dao)濾(lv)色片時(shi)才適(shi)合用(yong)彩(cai)色相機(ji)。

熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡(jing)可(ke)以(yi)用(yong)啟(qi)步(bu)BM1000Z 2000Z  BM4000D BM3000D，進(jin)口可(ke)使(shi)用(yong)奧(ao)林(lin)巴斯BX53、BX43、CKX53。尼(ni)康(kang)NI、CI系列等都(dou)可(ke)以(yi)，相機(ji)也(ye)可(ke)以(yi)用(yong)我(wo)公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都(dou)是(shi)不(bu)錯的選擇。