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          技(ji)術文(wen)章/ TECHNICAL ARTICLES

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          PCR基因擴增儀(yi)可(ke)滿(man)足(zu)苛(ke)刻的(de)實(shi)驗需求(qiu)

          更新時(shi)間:2020-08-21      瀏覽(lan)次(ci)數(shu):2041
           
            
            PCR基因擴增儀(yi)采(cai)用(yong)專有的(de)技(ji)術,有效避免(mian)了(le)熱傳(chuan)導(dao)的(de)邊(bian)緣(yuan)效應(ying)問(wen)題(ti),為PCR實(shi)驗提供(gong)溫(wen)度(du)均壹性(xing),確(que)保實(shi)驗結(jie)果的(de)可(ke)靠(kao)性(xing)和(he)重復性(xing),溫(wen)控(kong)系統,模式顯示(shi)金屬(shu)模塊的(de)溫(wen)度(du)變(bian)化(hua),能(neng)模擬(ni)試管內試劑的(de)溫(wen)度(du)變(bian)化(hua),甚(shen)至考(kao)慮(lv)到了(le)PCR反(fan)應(ying)體(ti)系對(dui)溫度(du)變(bian)化(hua)的(de)影(ying)響(xiang),模塊具(ju)有溫度(du)梯(ti)度(du)功(gong)能(neng),為前(qian)沿科研工(gong)作(zuo)者(zhe)提(ti)供30℃的(de)溫(wen)度(du)梯(ti)度(du)範(fan)圍,滿(man)足(zu)苛(ke)刻的(de)優化(hua)實驗需求(qiu)。
            
            PCR技(ji)術的(de)本(ben)質是體(ti)外核酸擴增,加熱使(shi)雙(shuang)鏈DNA解開螺旋,在退(tui)火(huo)溫(wen)度(du)條(tiao)件(jian)下(xia)引物同(tong)模板DNA雜(za)交,在TaqDNA聚(ju)合酶(mei),dNTPs,Mg2+和(he)合適(shi)pH緩沖(chong)液存(cun)在條件(jian)下(xia)延伸(shen)引物,重(zhong)復(fu)“變性(xing)→退(tui)火(huo)→引物延伸(shen)”過程至25~40個(ge)循(xun)環,呈(cheng)指(zhi)數(shu)級(ji)擴大待測(ce)樣(yang)本(ben)中的(de)核酸拷(kao)貝(bei)數(shu)。PCR擴增時(shi)加入的(de)引物利(li)用(yong)熒(ying)光(guang)素(su)進(jin)行(xing)標記(ji),使(shi)引物和(he)熒(ying)光(guang)探(tan)針同(tong)時(shi)與模板進(jin)行(xing)特異(yi)性(xing)結(jie)合,擴增結(jie)果通(tong)過熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)采(cai)集(ji)系統實(shi)時(shi)采(cai)集(ji)信(xin)號(hao)並輸(shu)送(song)到(dao)計算(suan)機分(fen)析(xi)處(chu)理系統,實(shi)時(shi)輸出(chu)量化(hua)結(jie)果,這(zhe)樣的(de)PCR儀(yi)叫(jiao)實時(shi)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)。
            
            PCR基因擴增儀(yi)不(bu)僅(jin)擁(yong)有30℃的(de)寬(kuan)限(xian)梯(ti)度(du)功(gong)能(neng),可(ke)用(yong)來優化(hua)實驗條件(jian),滿(man)足(zu)苛(ke)刻的(de)實(shi)驗需求(qiu),同(tong)時(shi)延續了(le)“USB”和(he)聯機聯網功(gong)能(neng),在之前基礎(chu)上(shang),增加了(le)LCD彩色(se)觸摸屏,使(shi)實(shi)驗的(de)顯示(shi)和(he)操作(zuo)更為清(qing)晰和(he)直接。
            
            PCR基因擴增儀(yi)的(de)PCR由變性(xing)、退(tui)火(huo)、延伸(shen)三個基本(ben)反(fan)應(ying)步(bu)驟構(gou)成(cheng)。
            
            1.模板DNA的(de)變(bian)性(xing):模板DNA經(jing)加熱至93℃左(zuo)右壹定時(shi)間後(hou),使(shi)模板DNA雙(shuang)鏈或經(jing)PCR擴增形成的(de)雙(shuang)鏈DNA解離,使(shi)之成為單(dan)鏈(lian),以便它(ta)與引物結(jie)合,為下(xia)輪(lun)反(fan)應(ying)作(zuo)準(zhun)備;
            
            2.模板DNA與引物的(de)退(tui)火(huo)(復(fu)性(xing)):模板DNA經(jing)加熱變(bian)性(xing)成(cheng)單(dan)鏈(lian)後(hou),溫度(du)降(jiang)至55℃左(zuo)右,引物與模板DNA單(dan)鏈(lian)的(de)互(hu)補(bu)序列(lie)配對(dui)結(jie)合;
            
            3.引物的(de)延伸(shen):DNA模板-引物結(jie)合物在TaqDNA聚(ju)合酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia),以dNTP為反(fan)應(ying)原(yuan)料,靶(ba)序列(lie)為模板,按(an)堿(jian)基配對(dui)與半(ban)保留(liu)復(fu)制(zhi)原(yuan)理,合成(cheng)壹條(tiao)新的(de)與模板DNA鏈(lian)互(hu)補(bu)的(de)半(ban)保留(liu)復(fu)制(zhi)鏈(lian)重(zhong)復(fu)循環變性(xing)、退(tui)火(huo)、延伸(shen)三過程,就(jiu)可(ke)獲(huo)得更多(duo)的(de)“半(ban)保留(liu)復(fu)制(zhi)鏈(lian)”,而且(qie)這(zhe)種新(xin)鏈(lian)又(you)可(ke)成(cheng)為下(xia)次(ci)循環的(de)模板。每(mei)完(wan)成(cheng)壹個(ge)循(xun)環需2~4分鐘(zhong),2~3小時(shi)就(jiu)能(neng)將(jiang)待擴增的(de)目的(de)基因擴增放大幾(ji)百(bai)萬(wan)倍。

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