PCR是(shi)聚合(he)酶鏈反應的(de)簡稱，是(shi)在(zai)短(duan)時間(jian)內(nei)體外大(da)量擴增特定(ding)的(de)DNA片(pian)段(duan)的(de)分(fen)子生物(wu)學(xue)技(ji)術。自動(dong)完(wan)成(cheng)聚合(he)酶鏈反應，提(ti)供DNA擴增的(de)溫度(du)條件(jian)而設(she)計的(de)儀(yi)器(qi)稱為(wei)PCR儀(yi)。
PCR儀(yi)主要(yao)用(yong)於(yu)DNA片(pian)段(duan)的(de)放大(da)，可將DNA分(fen)子或某壹DNA片(pian)段(duan)於(yu)數(shu)小(xiao)時(shi)內擴增至(zhi)十(shi)萬(wan)乃至(zhi)百萬(wan)倍，在(zai)這(zhe)過(guo)程(cheng)中(zhong)主要(yao)是(shi)3個(ge)特征溫度(du)循環(huan)：
1、高(gao)溫變性：把樣品加(jia)熱(re)至(zhi)90～95℃讓(rang)DNA模(mo)板變性變成單(dan)鏈。
2、低溫退火(huo)：讓(rang)樣品的(de)溫度(du)迅(xun)速(su)下降(jiang)至(zhi)50～65℃,引(yin)物(wu)就(jiu)可(ke)以結(jie)合(he)到(dao)模(mo)板上(shang)去(qu)。
3、適(shi)溫延(yan)伸：讓(rang)樣品的(de)溫度(du)上升至(zhi)70～75℃,DNA聚合(he)酶就(jiu)可(ke)以從(cong)引物(wu)開(kai)始(shi)用(yong)底物(wu)復制(zhi)出新(xin)鏈。
因此(ci)，在(zai)PCR反應過(guo)程(cheng)中(zhong)對溫度(du)控(kong)制的(de)要(yao)求(qiu)很高(gao)，良好(hao)的(de)溫度(du)控(kong)制是(shi)PCR儀(yi)質量(liang)好(hao)壞(huai)的(de)關鍵。
基因擴增的(de)基本(ben)要(yao)素：
1、DNA模(mo)板：待拷(kao)貝(bei)的(de)DNA稱為模(mo)板，它(ta)可(ke)以是(shi)雙(shuang)鏈DNA也可(ke)是(shi)單(dan)鏈DNA，Z後(hou)擴增得(de)到(dao)的(de)產物(wu)是(shi)雙(shuang)鏈狀態(tai)的(de)。
2、引物(wu)：是(shi)DNA復(fu)制的(de)先鋒，就(jiu)象(xiang)結晶(jing)過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)晶核，引導(dao)DNA的(de)合成。在(zai)PCR擴增中(zhong)壹(yi)般(ban)使(shi)用(yong)合成(cheng)的(de)寡核苷酸(suan)作(zuo)引(yin)物(wu)。
3、DNA聚合(he)酶(TaqDNA聚合(he)酶)：是(shi)DNA復(fu)制的(de)動(dong)力(li)，在(zai)dNTP等(deng)底物(wu)存在(zai)時(shi)在(zai)引(yin)物(wu)的(de)引導(dao)下(xia)沿著(zhe)模(mo)板DNA合(he)成(cheng)互(hu)補(bu)的(de)DNA鏈。
4、緩沖(chong)液：提(ti)供DNA合(he)成反應所(suo)需(xu)的(de)pH，離子強度(du)等環(huan)境(jing)。
5、4種(zhong)單(dan)核苷酸(suan)：dNTP，提(ti)供DNA合(he)成原(yuan)料。
PCR儀(yi)用(yong)途(tu)：
1、醫(yi)學(xue)和健(jian)康檢(jian)驗(yan)機(ji)構臨床診斷(duan)，用(yong)於(yu)判斷(duan)檢體中(zhong)是(shi)否(fou)會(hui)表現(xian)某遺傳(chuan)疾(ji)病的(de)圖(tu)譜(pu)、傳染病(bing)的(de)診斷(duan)以及(ji)基因(yin)復制。
2、DNA鑒定(ding)，常見(jian)於(yu)司(si)法鑒定(ding)領域。
3、臨(lin)床分(fen)子診斷(duan)試劑(ji)和生物(wu)試劑(ji)公(gong)司(si)藥(yao)品研(yan)發。
4、轉(zhuan)基因(yin)、微(wei)生(sheng)物(wu)、動(dong)物(wu)源性(xing)成(cheng)分(fen)檢測(ce)，常見(jian)於(yu)醫(yi)藥衛生(sheng)及(ji)農產(chan)品檢驗領域。
2、引(yin)物(wu)：是(shi)DNA復(fu)制的(de)先鋒，就(jiu)象(xiang)結晶(jing)過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)晶核，引導(dao)DNA的(de)合成。在(zai)PCR擴增中(zhong)壹(yi)般(ban)使(shi)用(yong)合成(cheng)的(de)寡核苷酸(suan)作(zuo)引(yin)物(wu)。
3、DNA聚合(he)酶(TaqDNA聚合(he)酶)：是(shi)DNA復(fu)制的(de)動(dong)力(li)，在(zai)dNTP等(deng)底物(wu)存在(zai)時(shi)在(zai)引(yin)物(wu)的(de)引導(dao)下(xia)沿著(zhe)模(mo)板DNA合(he)成(cheng)互(hu)補(bu)的(de)DNA鏈。
4、緩沖(chong)液：提(ti)供DNA合(he)成反應所(suo)需(xu)的(de)pH，離子強度(du)等環(huan)境(jing)。
5、4種(zhong)單(dan)核苷酸(suan)：dNTP，提(ti)供DNA合(he)成原(yuan)料。
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更(geng)新時(shi)間：2020-11-14 
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