PCR儀的(de)分類(lei)

更(geng)新(xin)時(shi)間:2015-10-29

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根(gen)據DNA擴(kuo)增的(de)目的(de)和(he)檢(jian)測的(de)標(biao)準(zhun)可(ke)以(yi)將PCR儀(yi)分為普通(tong)PCR儀(yi),梯度PCR儀,原位PCR,實(shi)時熒光(guang)定量(liang)PCR儀等(deng)幾(ji)類(lei)。
普通(tong)PCR儀(yi)
壹般把壹次PCR擴(kuo)增只(zhi)能運行(xing)壹個特定退火溫度的(de)PCR儀(yi),稱(cheng)之為(wei)普通(tong)PCR儀(yi)。如果要用(yong)它(ta)做(zuo)不(bu)同(tong)的(de)退(tui)火溫度則需(xu)要多次運行(xing)。主(zhu)要是用(yong)作簡(jian)單的(de),對(dui)目的(de)基因(yin)退火溫度的(de)擴(kuo)增。
主(zhu)要應(ying)用(yong)於(yu)科研(yan)、教學(xue)、臨(lin)床(chuang)醫(yi)學、檢(jian)驗、檢疫等(deng)。
梯(ti)度PCR儀
壹(yi)次性PCR擴(kuo)增可(ke)以(yi)設置(zhi)壹系(xi)列不(bu)同(tong)的(de)退(tui)火溫度條(tiao)件(jian)(通(tong)常(chang)12種(zhong)溫度梯度)的(de)稱(cheng)之為(wei)梯度PCR儀。因(yin)為被擴(kuo)增的(de)不(bu)同(tong)的(de)DNA片(pian)段其的(de)退(tui)火溫度不同(tong),通(tong)過(guo)設(she)置(zhi)壹系(xi)列的(de)梯(ti)度退火溫度進行擴(kuo)增,從而(er)壹(yi)次性PCR擴(kuo)增就(jiu)可(ke)以(yi)篩(shai)選(xuan)出(chu)表達量(liang)高的(de)退(tui)火溫度進行有(you)效的(de)擴(kuo)增。主(zhu)要用(yong)於(yu)研究(jiu)未(wei)知DNA退(tui)火溫度的(de)擴(kuo)增,這(zhe)樣既節(jie)約時間,也節(jie)約經費(fei)。在(zai)不設(she)置(zhi)梯度的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)亦可(ke)當(dang)做(zuo)普通(tong)的(de)PCR用(yong)。正真(zhen)的(de)梯(ti)度,是每(mei)壹排(pai)管都(dou)有(you)的(de)加(jia)熱控(kong)溫探頭(tou),2009年(nian)為(wei)止只有(you)美國ABI公(gong)司可(ke)以(yi)做(zuo)到(dao)。其(qi)他(ta)的(de)都(dou)是(shi)從兩頭(tou)的(de)熱(re)傳(chuan)遞來(lai)設(she)計控(kong)溫。
梯度PCR儀多應(ying)用(yong)於(yu)科研(yan)、教學(xue)機構。
原位PCR儀(yi)
(有(you)些(xie)品(pin)牌(pai)的(de)PCR儀(yi)具(ju)有(you)普通(tong)PCR、梯(ti)度PCR、原位PCR的(de)功能,通(tong)過(guo)替(ti)換模塊進行多用(yong)途(tu)開(kai)展(zhan)實(shi)驗工(gong)作(zuo))
是(shi)用(yong)於(yu)從細(xi)胞(bao)內(nei)靶(ba)DNA的(de)定位分析的(de)細(xi)胞(bao)內(nei)基因(yin)擴(kuo)增儀(yi)。如病原基因(yin)在細(xi)胞(bao)的(de)位置(zhi)或目的(de)基因(yin)在細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)作(zuo)用(yong)位置(zhi)等。可(ke)保(bao)持細(xi)胞(bao)或(huo)組(zu)織(zhi)的(de)完(wan)整(zheng)性,使(shi)PCR反應(ying)體系(xi)滲透(tou)到(dao)組(zu)織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)中,在細(xi)胞(bao)的(de)靶(ba)DNA所(suo)在的(de)位置(zhi)進行基因(yin)擴(kuo)增。不(bu)但(dan)可(ke)以(yi)檢測到靶(ba)DNA,還能標出(chu)靶(ba)序(xu)列在(zai)細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)位置(zhi)。於(yu)分子和(he)細(xi)胞(bao)水(shui)平(ping)上(shang)研究疾病的(de)發(fa)病機理(li)和(he)臨(lin)床(chuang)過(guo)程及(ji)病理(li)的(de)轉(zhuan)變(bian)有(you)著重(zhong)大(da)的(de)實(shi)用價值(zhi)。
實(shi)時熒光(guang)定量(liang)PCR儀
在(zai)普通(tong)PCR儀(yi)設計基礎(chu)上(shang)增加(jia)熒光(guang)信號(hao)激發(fa)和(he)采集(ji)系(xi)統和(he)計算機(ji)分析處(chu)理(li)系(xi)統,形成了具(ju)有(you)熒光(guang)定量(liang)PCR功能的(de)儀(yi)器(qi)。其(qi)PCR擴(kuo)增原理(li)和(he)普通(tong)PCR擴(kuo)增原理(li)相同(tong),在PCR擴(kuo)增時(shi)加(jia)入(ru)的(de)引物是利用同(tong)位素、熒光(guang)素等進行標(biao)記,使(shi)用引物和(he)熒(ying)光(guang)探針(zhen)同(tong)時與(yu)模板特異(yi)性結合擴(kuo)增。擴(kuo)增的(de)結果通(tong)過(guo)熒(ying)光(guang)信號(hao)采集(ji)系(xi)統實(shi)時采集(ji)信號(hao)連接輸(shu)送到(dao)計算機(ji)分析處(chu)理(li)系(xi)統,得(de)出(chu)量(liang)化(hua)的(de)實(shi)時結果輸(shu)出(chu)。
熒光(guang)定量(liang)PCR儀有(you)單通(tong)道(dao),雙通(tong)道(dao)和(he)多通(tong)道(dao)之分。當只(zhi)用壹(yi)種(zhong)熒光(guang)探針(zhen)標記的(de)時(shi)候(hou),選(xuan)用單通(tong)道(dao);有(you)多種(zhong)熒光(guang)標記的(de)時(shi)候(hou)使用(yong)多通(tong)道(dao)。單通(tong)道(dao)也可(ke)以(yi)檢測多熒(ying)光(guang)的(de)標(biao)記和(he)目的(de)基因(yin)表達產(chan)物,因(yin)為壹(yi)次只能檢測壹種(zhong)目的(de)基因(yin)的(de)擴(kuo)增量(liang),需多次擴(kuo)增才(cai)能檢測完不同(tong)的(de)目的(de)基因(yin)片(pian)段的(de)量(liang)。多通(tong)道(dao)利於(yu)做(zuo)多重(zhong)PCR,實(shi)現壹次檢測多種(zhong)目的(de)基因(yin)的(de)功能。
實(shi)時熒光(guang)定量(liang)PCR儀主(zhu)要(yao)應(ying)用於(yu)臨(lin)床(chuang)醫(yi)學檢(jian)測、生物醫(yi)藥(yao)研發(fa)、食(shi)品(pin)行(xing)業(ye)、科(ke)研院(yuan)校(xiao)等(deng)