PCR基因擴(kuo)增(zeng)儀是自(zi)動化(hua)和智(zhi)能(neng)化(hua)的(de)儀器(qi)設備

更新時(shi)間:2015-11-20

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PCR基因(yin)擴(kuo)增(zeng)儀的(de)設計均(jun)按(an)照DNA變(bian)性、復(fu)性和延(yan)伸(shen)三個(ge)環(huan)節(jie)以及(ji)溫度均(jun)恒、傳導(dao)快和升(sheng)降(jiang)溫迅速等原則(ze),結(jie)合(he)傳感技術、微(wei)電子技術和電子計算機等技術發(fa)展(zhan)而成(cheng)的(de)自(zi)動化(hua)和智(zhi)能(neng)化(hua)的(de)儀器(qi)設備
PCR基因擴(kuo)增(zeng)儀是利用DNA聚合(he)酶對(dui)特定基(ji)因做(zuo)體(ti)外或試管內InVitro的(de)大(da)量(liang)合(he)成(cheng),它(ta)是利用DNA聚合(he)酶進行專壹性的(de)連鎖(suo)復(fu)制(zhi)。目前常用(yong)的(de)技術,可以將壹段(duan)基因(yin)復制(zhi)為(wei)原來的(de)壹百億至壹千億(yi)倍。根(gen)據(ju)DNA擴(kuo)增(zeng)的(de)目的(de)和檢測(ce)的(de)標準,可(ke)以將PCR儀分為(wei)普(pu)通PCR儀,梯度PCR儀,原位(wei)PCR儀,實時(shi)熒光(guang)定量(liang)PCR儀四類(lei)。
PCR基(ji)因(yin)擴(kuo)增(zeng)儀技術原理
該(gai)技術是在模板(ban)DNA、引(yin)物和四(si)種(zhong)脫氧核(he)糖(tang)核(he)苷(gan)酸(suan)存(cun)在(zai)下(xia),依(yi)賴(lai)於(yu)DNA聚合(he)酶的(de)酶促(cu)合(he)成(cheng)反(fan)應。DNA聚合(he)酶以單(dan)鏈(lian)DNA為模板(ban),借(jie)助(zhu)壹小段(duan)雙鏈(lian)DNA來啟動合(he)成(cheng),通過壹個(ge)或(huo)兩個(ge)人(ren)工合(he)成(cheng)的(de)寡核(he)苷(gan)酸(suan)引(yin)物與單(dan)鏈(lian)DNA模板(ban)中(zhong)的(de)壹段(duan)互補(bu)序(xu)列(lie)結(jie)合(he),形成(cheng)部(bu)分雙鏈(lian)。在適宜的(de)溫度和環(huan)境下(xia),DNA聚合(he)酶將脫氧單(dan)核(he)苷(gan)酸(suan)加到(dao)引(yin)物3´-OH末端(duan),並以此為(wei)起(qi)始點(dian),沿模(mo)板(ban)5´→3´方(fang)向延(yan)伸(shen),合(he)成(cheng)壹條(tiao)新(xin)的(de)DNA互補(bu)鏈(lian)。
PCR基因擴(kuo)增(zeng)儀反(fan)應步(bu)驟(zhou)
分別是(shi)1.變(bian)性,2.引(yin)物退火,3.引(yin)物延(yan)伸(shen)。所(suo)謂變(bian)性是(shi)將DNA加熱(re)至90-95℃變(bian)性,將雙鏈(lian)DNA加熱(re)後轉(zhuan)為單(dan)鏈(lian)DNA做為復制(zhi)的(de)模板(ban).而引(yin)物退火則是引(yin)物於壹定的(de)溫度下(冷(leng)卻(que)至55-60℃)附著(zhe)於模板(ban)DNA兩端(duan)。zui後在(zai)DNA聚合(he)酶的(de)作(zuo)用下(xia)(加(jia)熱(re)至70-75℃)進行引(yin)物的(de)延(yan)伸(shen)及(ji)另(ling)壹鏈(lian)的(de)合(he)成(cheng)。